Técnica nueva de clonación puede evaluar con exactitud la transmisibilidad de mutantes futuros del SARS-CoV-2
Por el equipo editorial de HospiMedica en español Actualizado el 02 Mar 2021 |
Imagen: Un investigador trabaja en el laboratorio de alta seguridad del Instituto de Virología e Inmunología (Fotografía cortesía del IVI)
Utilizando la última tecnología de secuenciación y técnicas de PCR, un equipo internacional de investigadores desarrolló un método que puede evaluar con exactitud la transmisibilidad de nuevas mutaciones del virus SARS-CoV-2.
Los hallazgos del equipo internacional, incluidos investigadores de la Universidad de Berna (Berna, Suiza), son extremadamente importantes para evaluar el riesgo de que nuevos mutantes se propaguen desenfrenadamente, ya que muestran cómo una ventaja de aptitud de las variantes del virus puede conducir a una mayor transmisión.
Antes de la aparición de nuevos mutantes del coronavirus, como la variante B.1.1.7 del Reino Unido, la variante del SARS-CoV-2 denominada D614G ya había mutado del patógeno original del SARS-CoV-2 que desencadenó la pandemia. D614G se ha extendido rápidamente para convertirse en la variante más abundante en todo el mundo y esta mutación D614G permanece en todas las nuevas variantes emergentes. El equipo internacional de investigadores pudo demostrar, tanto en el laboratorio como en modelos animales, por qué la variante D614G pudo ganarle al virus SARS-CoV-2 original.
La variante D614G lleva una mutación en la proteína Spike que facilita que el virus se adhiera a las células humanas. Los investigadores demostraron por primera vez en cultivos de células humanas del tracto respiratorio superior, así como de la nariz, que la variante D614G se une con más fuerza y también se replica más rápido que el virus original. El aumento de la replicación de la variante D614G también se confirmó in vivo, en un nuevo modelo de ratón descrito por primera vez en este estudio.
La propagación de los virus del SARS-CoV-2 se puede estudiar mejor en otros animales que en ratones. Los hámsteres y hurones están bien establecidos en la investigación de infecciones y son modelos animales especialmente adecuados. Para comparar las dos variantes, se aplicó una mezcla de partes iguales de la versión original del virus SARS-CoV-2 y la variante D614G en la nariz de cada animal bajo anestesia ligera. Después de un día, los animales infectados experimentalmente fueron realojados con otro animal centinela sano de la misma especie, para evaluar la transmisión de las dos variantes en competencia directa entre sí. El experimento se repitió con seis parejas de animales en total. En prácticamente todos los animales centinela, la proporción de virus del SARS-CoV-2 transmitidos estuvo dominada masivamente por la variante D614G desde el principio.
La diferenciación de las variantes se llevó a cabo con la última tecnología de secuenciación y técnicas de PCR. Este método se puede usar incluso para probar cualquier mutación única o una combinación específica de mutaciones que están presentes en una serie de variantes virales que circulan actualmente. El método se basa en una técnica de clonación desarrollada en Berna hace un año, en la que los virus del SARS-CoV-2 se pueden reproducir exactamente en el laboratorio. Se sabe que el virus del Reino Unido, por ejemplo, tiene no solo una, sino a menudo más de 14 mutaciones, ocho de las cuales ocurren en la proteína Spike. Por tanto, con la ayuda de la técnica de clonación, se pueden reproducir y utilizar cualquier número de mutaciones de variantes para competir entre sí en los cultivos celulares y modelos animales establecidos. Los resultados muestran cómo las mutaciones individuales afectan la aptitud y la transmisibilidad de nuevas variantes.
“Nuestro método también nos permite caracterizar mutaciones emergentes como la variante británica B.1.1.7 de una manera mejor y más rápida”, dijo Volker Thiel del Instituto de Virología e Inmunología (IVI), uno de los cuatro autores principales del estudio. “Nuestro estudio se destaca porque pudimos discernir claramente la transmisión más eficiente de la variante mutada en comparación directa con la variante original. Nuestra estrategia de prueba nos permite examinar rápidamente por qué se han establecido otras variantes de virus de emergencia reciente”.
Enlace relacionado:
Universidad de Berna
Los hallazgos del equipo internacional, incluidos investigadores de la Universidad de Berna (Berna, Suiza), son extremadamente importantes para evaluar el riesgo de que nuevos mutantes se propaguen desenfrenadamente, ya que muestran cómo una ventaja de aptitud de las variantes del virus puede conducir a una mayor transmisión.
Antes de la aparición de nuevos mutantes del coronavirus, como la variante B.1.1.7 del Reino Unido, la variante del SARS-CoV-2 denominada D614G ya había mutado del patógeno original del SARS-CoV-2 que desencadenó la pandemia. D614G se ha extendido rápidamente para convertirse en la variante más abundante en todo el mundo y esta mutación D614G permanece en todas las nuevas variantes emergentes. El equipo internacional de investigadores pudo demostrar, tanto en el laboratorio como en modelos animales, por qué la variante D614G pudo ganarle al virus SARS-CoV-2 original.
La variante D614G lleva una mutación en la proteína Spike que facilita que el virus se adhiera a las células humanas. Los investigadores demostraron por primera vez en cultivos de células humanas del tracto respiratorio superior, así como de la nariz, que la variante D614G se une con más fuerza y también se replica más rápido que el virus original. El aumento de la replicación de la variante D614G también se confirmó in vivo, en un nuevo modelo de ratón descrito por primera vez en este estudio.
La propagación de los virus del SARS-CoV-2 se puede estudiar mejor en otros animales que en ratones. Los hámsteres y hurones están bien establecidos en la investigación de infecciones y son modelos animales especialmente adecuados. Para comparar las dos variantes, se aplicó una mezcla de partes iguales de la versión original del virus SARS-CoV-2 y la variante D614G en la nariz de cada animal bajo anestesia ligera. Después de un día, los animales infectados experimentalmente fueron realojados con otro animal centinela sano de la misma especie, para evaluar la transmisión de las dos variantes en competencia directa entre sí. El experimento se repitió con seis parejas de animales en total. En prácticamente todos los animales centinela, la proporción de virus del SARS-CoV-2 transmitidos estuvo dominada masivamente por la variante D614G desde el principio.
La diferenciación de las variantes se llevó a cabo con la última tecnología de secuenciación y técnicas de PCR. Este método se puede usar incluso para probar cualquier mutación única o una combinación específica de mutaciones que están presentes en una serie de variantes virales que circulan actualmente. El método se basa en una técnica de clonación desarrollada en Berna hace un año, en la que los virus del SARS-CoV-2 se pueden reproducir exactamente en el laboratorio. Se sabe que el virus del Reino Unido, por ejemplo, tiene no solo una, sino a menudo más de 14 mutaciones, ocho de las cuales ocurren en la proteína Spike. Por tanto, con la ayuda de la técnica de clonación, se pueden reproducir y utilizar cualquier número de mutaciones de variantes para competir entre sí en los cultivos celulares y modelos animales establecidos. Los resultados muestran cómo las mutaciones individuales afectan la aptitud y la transmisibilidad de nuevas variantes.
“Nuestro método también nos permite caracterizar mutaciones emergentes como la variante británica B.1.1.7 de una manera mejor y más rápida”, dijo Volker Thiel del Instituto de Virología e Inmunología (IVI), uno de los cuatro autores principales del estudio. “Nuestro estudio se destaca porque pudimos discernir claramente la transmisión más eficiente de la variante mutada en comparación directa con la variante original. Nuestra estrategia de prueba nos permite examinar rápidamente por qué se han establecido otras variantes de virus de emergencia reciente”.
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